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胶体金作为一种新的免疫学方法,具有简单、准确、快速、无污染等特点。但是检测范围有限、主要针对病死猪的检测(活的病毒含量达到一定量才可检测出来),灵敏度相对荧光PCR较低,特异性较强。所以个人推荐使用大华农非洲猪瘟荧光PCR检测试剂盒。不懂的可以追问哦,祝你工作顺利
免疫胶体金技术的基本原理:
胶体金在弱碱环境下带负电荷,可与蛋白质分子的正电荷基团形成牢固的结合,由于这种结合是静电结合,所以不影响蛋白质的生物特性。
胶体金除了与蛋白质结合以外,还可以与许多其它生物大分子结合,如spa、pha、cona等。根据胶体金的一些物理性状,如高电子密度、颗粒大小、形状及颜色反应,加上结合物的免疫和生物学特性,因而使胶体金广泛地应用于免疫学、组织学、病理学和细胞生物学等领域。
胶体金标记,实质上是蛋白质等高分子被吸附到胶体金颗粒表面的包被过程。吸附机理可能是胶体金颗粒表面负电荷,与蛋白质的正电荷基团因静电吸附而形成牢固结合。用还原法可以方便地从氯金酸制备各种不同粒径、也就是不同颜色的胶体金颗粒。这种球形的粒子对蛋白质有很强的吸附功能,可以与葡萄球菌a蛋白、免疫球蛋白、毒素、糖蛋白、酶、抗生素、激素、牛血清白蛋白多肽缀合物等非共价结合,因而在基础研究和临床实验中成为非常有用的工具。
免疫金标记技术(immunogold
labelling
technique)
主要利用了金颗粒具有高电子密度的特性,在金标蛋白结合处,在显微镜下可见黑褐色颗粒,当这些标记物在相应的配体处大量聚集时,肉眼可见红色或粉红色斑点,因而用于定性或半定量的快速免疫检测方法中,这一反应也可以通过银颗粒的沉积被放大,称之为免疫金银染色。
原理
1971年engvall和perlmann发表了酶联免疫吸附剂测定(enzyme
linked
immunosorbent
assay,elisa)用于igg定量测定的文章,使得1966年开始用于抗原定位的酶标抗体技术发展成液体标本中微量物质的测定方法。这一方法的基本原理是:①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在测定时,把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开,最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化变为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据颜色反应的深浅刊物定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,故可极大地放大反应效果,从而使测定方法达到很高的敏感度。
甲基对硫磷胶体金快速检测卡是一种不需要任何仪器设备的快速检测卡,用于检测农产品中甲基对硫磷的含量,本品检测阈值为0.5mg/kg。甲基对硫磷快速检测卡应用了竞争抑制免疫层析的原理,样本中的甲基对硫磷在流动的过程中与胶体金标记的特异性单克隆抗体结合,抑制了抗体和NC膜检测线上甲基对硫磷-BSA偶联物的结合。如果样本中甲基对硫磷含量大于或等于0.5mg/kg,检测线(T)无红色条带出现,结果为阳性;反之,检测线(T)显示红色条带,结果为阴性。阴性表示样品中甲基对硫磷浓度低于检测限或者不含。阳性则表示样品中甲基对硫磷残留浓度大于检测限,无效指的是质控线(C)不显色;可能是操作不当或者检测卡失效。用新的检测卡重新检测。以上是瑞森生物小编总结的甲基对硫磷胶体金快速检测卡的作用,仅供参考。
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